線粒體是細胞的能量工廠，其功能還涉及細胞代謝、信號傳導、分化、生長、凋亡和死亡等多個重要生理過程。線粒體自噬(mitophagy)是細胞清除損傷或衰老的線粒體，并循環利用其組成元素的過程，因此線粒體自噬的研究具有重要意義。目前，對線粒體自噬的研究主要采用抗體或熒光蛋白標記法，或線粒體熒光探針和溶酶體熒光探針組合使用共同檢測。但前者操作復雜，在活細胞中應用受到限制；而后者特異性較低。
對pH敏感的探針分子HQO無需與其它探針分子組合使用，其進入活細胞后選擇性富集于線粒體；當線粒體發生自噬形成自噬溶酶體后其微環境pH下降，導致HQO質子化；質子化后HQO的熒光激發和發射波長均發生紅移（斯托克斯位移大于100 nm）。由于微環境pH值的不同，使得HQO在線粒體和自噬溶酶體中呈現不同顏色的熒光，因而可以很好地區分正常線粒體和包被損傷線粒體的自噬溶酶體。HQO分子可精確定位線粒體，準確示蹤線粒體自噬過程；該探針分子將為線粒體代謝過程提供新的研究方法，也為篩選線粒體自噬抑制劑或促進劑提供有效的工具。
HQO具有兩個激發與相應發射波長，一個示蹤線粒體，一個示蹤自噬溶酶體，通過兩個波長的變化來闡述自噬流程。和已有常規自噬檢測方法相比，它具有如下優勢：①樣品制備簡單；②操作步驟少；③特異性指示線粒體被噬到自噬溶酶體形成的過程，且能特異性指示局部線粒體的被噬；④所需相應耗材及工具較少。[1]
圖一：探針HQO和HQO示蹤活細胞線粒體自噬過程原理圖
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產品編號
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產品名稱
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簡稱
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CAS
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結構式
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2668725
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2,6-雙（2-（3,3-二甲基-1-丙基 - 二氫吲哚-2-亞基）亞乙基） - 環己酮
2,6-Bi(2-(3,3-dimethyl-1-propylindolin-2-ylidene)ethylidene)-cyclohexanone
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HQO
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1442645-34-2
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產品使用說明：
1、細胞的培養，將細胞種植于共聚焦培養皿中，根據不同實驗需要種植相應細胞密度及培養相應時間。
2、誘導自噬、細胞染色和共聚焦成像。適當條件誘導自噬（如無血清培養基、PBS或者細胞自噬激活劑處理等），HQO（10 μM）于無血清培養基中加入培養皿中37℃孵育10 min，PBS洗滌一到三次，共聚焦成像。559 nm激發，570-610 nm發射波長為示蹤正常線粒體的熒光；635 nm激發，650-730 nm發射波長為示蹤自噬溶酶體的熒光。
更多熒光探針產品
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產品編號
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產品名稱
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CAS
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結構式
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2668724
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2,9-雙[4-（4-甲基哌嗪-1-基）苯乙烯基]-1,10 - 菲咯啉
2,9-Bis[4-(4-methylpi-perazin-1-yl)styryl]-1,10-phenanthroline
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1792998-33-4
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2668726
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N-己酸基-4H-1,2,4-三氮唑(1,5-a)二氮雜環-1,8-萘酰亞胺
3,9-Dihydro-1,3-dioxopyrido[3,4,5-gh][1,2,4]triazolo[1,5-a]perimidine-2(1h)-hexanoic acid
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1359819-97
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2668727
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CSTS
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N/A
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.jpg)
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433521
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D-熒光素鉀鹽
D-Luciferin potassium salt
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115144-35-9
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.jpg)
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102273
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2,3-二氨基萘
2,3-Diaminonaphthalene
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771-97-1
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2668723
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9-甲基-3,6-雙[5-（4-甲基哌嗪-1-基）-1H-苯并[d]咪唑-2-基] -9H-咔唑
9-Methyl-3,6-bis[5-(4-methylpiperazin-1-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl]-9H-carbazole
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1514901-89-3
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227585
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鄰苯二甲醛
o-Phthalaldehyde
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643-79-8
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相關文獻
[1] Ying Liu, Jin Zhou, Linlin Wang, Xiaoxiao Hu, Xiangjun Liu, Meirong Liu, Zehui Cao, Dihua Shangguan and Weihong Tan. A Cyanine Dye to Probe Mitophagy: Simultaneous Detection of Mitochondria and Autolysosomes in Live Cells, J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (38), pp 12368–12374, DOI: 10.1021/jacs.6b04048；
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